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在生物医学研究中,细胞培养是一项基础而关键的技术。为了确保培养环境的纯净和稳定,科学家们常常需要使用抗生素来预防和控制微生物污染。G418,作为一种常用的筛选抗生素,因其独·特的作用机制和广泛的应用范围,在细胞培养领域中扮演着重要角色。
G418,也称为Geneticin或遗传霉素,属于氨基糖苷类抗生素。它通过与核糖体不可逆地结合,破坏其校对能力,导致翻译过程提前终止或发生错译,从而抑制蛋白质合成,阻止敏感细胞的生长。
G418的结构中含有双碱基环醇和2-脱氧链霉胺,这些结构通过糖苷键与氨基糖连接。G418的独·特性来源于其C-6位置的羟基功能,而非氨基功能。这种结构上的差异使得G418能够与80S核糖体复合物特异性结合,相较于其他氨基糖苷类药物,G418对真核细胞蛋白质合成的抑制作用更为显著。
G418常被用于筛选表达氨基糖苷类修饰酶的细胞株。这些修饰酶,如氨基糖苷磷酸转移酶(APH),能够共价修饰G418的氨基或羟基功能,削弱药物与核糖体的相互作用,从而产生耐药效果。当真核细胞成功转染新霉素抗性基因后,它们能够高效表达氨基糖苷磷酸转移酶,获得在含有G418的选择性培养基中生长的能力。
G418作为真核翻译抑制剂的推荐筛选浓度范围为100-800 μg/mL。然而,有效的杀伤浓度会因细胞类型、培养基、生长条件等多种因素而异。因此,为了确保筛选的成功,建议通过实验确定每个特定培养系统的工作浓度。
康宁公司是全·球领·先的生命科学和材料科学创新者,其细胞培养产品组合包括一系列抗生素和抗真菌试剂产品。这些产品可以满足从杀菌到抑菌的多种需求,为细胞培养提供适合的环境,也可用于微生物或哺乳动物细胞的筛选性培养。康宁的产品以其高质量和可靠性而闻名,是科研人员在实验室研究中不·可·或缺的工具。
G418有液体和粉末两种形式,液体形式的浓度为50 mg/mL,粉末形式的纯度大于700 μg/mg。储存条件也有明确要求:液体需在2℃~8℃下保存,粉末则在15℃~30℃下避光存放。康宁提供多种规格的G418产品,以满足不同规模研究的需求。