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原代细胞基因编辑效率突破80%!科研人的高效新选择

更新时间:2025-04-24

阅读:59

用户真实反馈:科研大咖的“真香"体验

“CD3被敲低了80%多!你们这试剂的确有点东西!我做原代的,每次都得敲,以后我要长期回购!"

原代细胞基因编辑效率突破80%!科研人的高效新选择

这条来自一线科研人的反馈,印证了ProteanFect CRISPRMax的硬核实力。无论是基因敲除、点突变还是大片段插入,这款试剂盒均能稳定输出高效结果。


今天,我们为您带来一款革命性产品——ProteanFect CRISPRMax Cas9基因编辑转染试剂盒。它凭借非病毒非电转非脂质体的独·特技术,轻松实现原代细胞80%以上的基因编辑效率,成为国内外实验室的“明星工具"!


产品核心优势:为何选择ProteanFect CRISPRMax?

1. 专为原代与难转细胞设计,效率突破瓶颈

原代细胞转染效率高达80%+:用户实测数据显示,人原代Treg细胞中CD3基因敲低效率超过80%,与说明书中的流式数据(86% CD3阴性率)高度一致。

难转细胞系的救星:无论是悬浮细胞还是贴壁细胞,均能稳定递送Cas9 mRNA和sgRNA,共表达率超90%。

2. 安全无忧:非病毒、无毒性、零残留

基于自组装蛋白纳米颗粒技术,无需病毒载体或脂质体,避免基因组整合风险,显著降低细胞毒性。

转染后细胞活力恢复快,第二天即可正常培养,实验周期大幅缩短。

3. 操作极简,节省成本

预混试剂+明确步骤:只需按表配置Reagent A/B/C,孵育后即可完成转染。

无需耗费高成本构建基因敲除鼠,直接实现T细胞稳定基因高效敲除。

技术揭秘:蛋白纳米颗粒如何实现高效递送?

ProteanFect CRISPRMax的核心在于其自组装蛋白纳米颗粒技术:

高效负载:带正电的纳米颗粒通过静电作用吸附Cas9 mRNA和sgRNA,形成稳定复合物。

精准递送:复合物通过内吞作用进入细胞后,迅速释放核酸,避免溶酶体降解。

安全释放:无需依赖病毒或脂质体的膜融合机制,减少细胞损伤。


实验验证:

靶向人TRAC基因的sgRNA转染原代T细胞后,TIDE测序显示编辑效率达88.5%,与流式结果高度吻合。

EGFP mRNA共转染阳性率超90%,轻松监控转染效果。

数据分享:高效基因编辑,从ProteanFect开始

使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因编辑转染试剂盒转染人原代 T 细胞,使用试剂盒中的 human TRAC-sgRNA 阳性对照敲除 TRAC 基因。在转染 72 小时后,收集细胞,在蛋白水平(图 1)和 DNA 水平(图 2)检测基因敲除的效率。

原代细胞基因编辑效率突破80%!科研人的高效新选择

图 1. 使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因编辑转染试剂盒编辑人原代 T 细胞中 TRAC基因后,TCR 蛋白表达的流式检测结果。流式结果显示,阳性对照组中约 86%的 T 细胞为 CD3阴性,表明该试剂盒同时递送 Cas9 mRNA/sgRNA,总细胞群中约有 86%细胞的 TRAC 基因被成功编辑。

原代细胞基因编辑效率突破80%!科研人的高效新选择

图 2.使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因编辑转染试剂盒编辑人原代 T 细胞中 TRAC 基因的测序分析结果。收集转染后的总细胞提取基因组 DNA,对靶点位置 PCR 扩增(正向引物序列:GCAGTATTATTAAGTAGCCCT,反向引物序列:AACAAGGCTCACTGTTTCTT)并进行Sanger 测序,通过 TIDE 对测序结果进行分析,结果显示阳性对照组中靶点基因被编辑的比例约为 88.5%,与流式检测蛋白水平的敲除结果(CD3-TCR 流式阴性比例)相当。


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