人间充质干细胞无血清培养基_*_细胞培养

产品英文名称：MesenGro ® Human mesenchymal stem cells medium, 500ml
产品中文名称：MesenGro ® 500mL 人间充质干细胞培养基

上海华雅思创的人间充质干细胞具有光明的临床治疗前景。然而，常用培养基含有胎牛血清（FBS），增加了病原体、异种抗原、批间不稳定性。美国FDA正考虑禁止使用 FBS于细胞治疗。为此，StemRD成功研制了MessenGro®，一种无血清、无异种蛋白、化学成分明确的人间充质干细胞培养基。
MesenGro® 化学成分明确，设计用于人体骨髓、脐带血和脂肪组织等间充质干细胞的zui大程度扩增。MesenGro® 化学成分明确是由于它的成分既没有化学合成，也没有重组体生产。
人间充质干细胞培养基直接来源于非人体动物细胞，无异种蛋白质。MesenGro® 如果用于一定组织细胞培养瓶中无需铺板蛋白，可以节约铺板材料和铺板时间。

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：stemcell@ys-bio.com

MesenGro ® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基 产品特性：
» 无血清 Serum-Free
» 无异种蛋白 Xeno-Free
» 化学成分明确 Chemically-Defined
» 无需昂贵的铺板蛋白 No Plate Coating Necessary
» 生长分化优于血清培养基 Perform Better than FBS Medium

MesenGro® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基 产品组成成分：
Part A: Mesen Gro基础培养基 规格：1x450ml 保存温度：2-8 ℃，避光 保质期：6个月
Part B: Mesen Gro补充培养基 规格：1x50ml 保存温度：-80℃，避光   保质期：6个月

MesenGro® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基 产品应用：

仅供研究使用。不适用于人或动物体外诊断与治疗。

MesenGro® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基  产品信息：

Human mesenchymal stem cells （hMSCs） hold promise for the treatment of a wide variety of diseases. Currently, fetal bovine serum （FBS） is added to the medium to achieve expansion of hMSCs. However, concerns have been raised over animal-born pathogens, immune reactions and lot-to-lot variations caused by the undefined nature of FBS. To address these issues, StemRD has developed MesenGro, a chemically-defined, serum-free and xeno-free medium for the expansion of hMSCs.
The MesenGro Chemically Defined MSC Medium （for simplicity, referred to as MesenGro in this document） has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells （MSCs） derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue.MesenGro is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels （see below）, saving cost of coating materials and time needed for coating.

MesenGro® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基 相关操作：

人间充质干细胞复苏

1.把人间充质干细胞培养基放入37°C水浴中预热；
2.从液氮中取出间充质干细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续孵育细胞）；
3.在超净台中加入5ml的人间充质干细胞培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清,加入5ml的人间充质干细胞*培养基重悬细胞，转移到T-25细胞培养瓶中（带滤芯）；
5.将培养瓶置于37℃，5% CO2的无菌培养箱中培养；

6.第二天，用新鲜的人间充质干细胞*培养基给细胞换液。

人间充质干细胞传代培养

1.在显微镜下观察细胞（细胞生长在人间充质干细胞培养基中，且是次传代），当细胞融合度超过80%时，即可传代培养；

2.37℃水浴预热培养基；

3.在超净台中，弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞；

4.在显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，即可加入5ml人间充质干细胞*培养基终止消化；

5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散；

6.将细胞转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

7.弃上清,加入15-20ml的人间充质干细胞*培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例接种到T-25细胞培养瓶中（确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间），细胞密度在1x104 cells/cm2 (2.5x105 cells/T-25  瓶），混合细胞悬液，确保细胞均匀分布；

8.将培养瓶置于37°C，5% CO2的无菌培养箱中培养；

9.每两天用新鲜、预热的人间充质干细胞*培养基进行换液。

人间充质干细胞冻存

间充质干细胞冻存可用百恩维的“无DMSO无血清细胞冻存液",具体操作如下。

1. 细胞消化和计数，用胰酶对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数；

2. 1000rpm离心5分钟，去掉上清；

3. 根据细胞计数的情况，加入适量的冻存液，使细胞密度在1×106/ml左右（或根据自己希望达到的细胞密度）；

4. 轻轻地重悬细胞（务必重悬均匀），将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖；

5. 将冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃；

6. 第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。

MesenGro® 500mL 人间充质干细胞无血清培养基 注意事项：

1.在配制*培养基前，请把胎牛血清（FBS）、间充质干细胞生长添加剂（MSCGS）、青霉素-链霉素（P/S）放到2-8℃冰箱第二天解冻。

2.在使用*培养基前，需要把培养基放到37℃恒温水浴中预热，注意温度不要超过37℃。

3.请把配制好的*培养基放在4℃冰箱避光保存，并尽量在一个月内使用完。若培养基要分几次使用，请将胎牛血清（FBS）、人间充质干细胞生长添加剂（MSCGS）、青霉素-链霉素（P/S）解冻按用量分装后保存。

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